牛奶中氟苯尼考檢測的固相萃取方法
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牛奶中氟苯尼考檢測的固相萃取方法
規格介紹:牛奶中氟苯尼考檢測的固相萃取方法
牛奶中氟苯尼考檢測的固相萃取方法
(FineTech® HLB)
一、實驗目的
本研究利用固相萃取作為樣品前處理方法,HPLC作為分析方法,檢測牛奶樣品中的氟苯尼考殘留水平。該方 法操作簡便,可簡化樣品前處理過程,減少有機溶劑的使用。
二、實驗目標物
氟苯尼考(CAS: 73231-34-2)。
三、應用範圍
本方法適用於牛奶中氟苯尼考的檢測的HPLC檢測及確證。
四、實驗材料
FineTech® HLB 固相萃取柱 60mg/3mL(Cat. No. COHLB360)。
五、實驗步驟
1.樣品提取
準確稱取牛奶2 g(精確到0.001 g),加入乙酸乙酯15 mL,高速均質1 min,加入5 g無水硫酸鈉,渦旋振盪1 min,搖床振盪10 min。 4000 r/min轉速離心5 min。將上清液轉移至梨形瓶中,於45 ℃旋蒸至近幹,用6 mL水溶解殘渣,5 mL×2次正己烷除脂,棄去正己烷層,取3 mL水層待淨化。
2、SPE柱淨化
(1) 活化:HLB 固相萃取柱使用前依次使用5 mL甲醇和5 mL水活化。
(2) 上樣和洗脫:將待淨化液加入已活化好的固相萃取柱中,以2 mL/min的流速過柱,棄去濾液,用5 mL水淋洗固相萃取柱,棄去淋洗液,抽乾5 min。用5 mL 5%氨化甲醇洗脫固相萃取柱,收集洗脫液。
(3) 重新溶解:洗脫液於45 ℃氮吹吹乾,用1 mL甲醇定容,0.22 μm微孔濾膜過濾,供HPLC上機測試。
3、HPLC條件
設備:Waters Alliance 2690
色譜柱:Welch Ultimate XB-C18 (4.6×250 mm, 5μ ) m
檢測器:Waters 2487 紫外檢測器
檢測波長:224 nm
流動相:A:水 B:乙腈
洗脫方式:等度洗脫
表1 流動相等度洗脫條件
時間(min) | %A | %B |
20 | 83 | 17 |
流速:1 mL/min
進樣體積:20μL
六、實驗結果
1、牛奶中氟苯尼考的5 mg/kg添加回收結果
表2 牛奶中氟苯尼考的5 mg/kg添加回收結果
目標物 | 回收率(%) | 平均 回收率(%) | RSD(%) | ||
1 | 2 | 3 | |||
氟苯尼考 | 112.34 | 109.23 | 111.84 | 111.14 | 1.50 |
2、 添加水平為5 mg/kg牛奶中氟苯尼考殘留物色譜圖
圖1 添加水平為5 mg/kg牛奶中氟苯尼考殘留物色譜圖