動物源食品中硝基呋喃類代謝物殘留檢測的固相萃取方法
產品介紹
動物源食品中硝基呋喃類代謝物殘留檢測的固相萃取方法
規格介紹:動物源食品中硝基呋喃類代謝物殘留檢測的固相萃取方法
動物源食品中硝基呋喃類代謝物殘留檢測的固相萃取方法
(FineTech® HLB)
一、實驗目的
本法為以FineTech® HLB(60mg/3mL)柱開發的針對動物源食品(豬肉、牛肉、雞肉、豬肝和水產品)中硝基呋喃類代謝物殘留檢測的樣本前處理淨化方法,HPLC法作為檢測手段。 Copure™ HLB(60mg/3mL)柱淨化效果良 好,回收率滿足測試要求,重現性好,與知名廠商同型號柱性能相當。
二、實驗目標物
土黴素(CAS:79-57-2),四環素(CAS:60-54-8),金黴素(CAS:57-62-5),強力黴素(CAS:564-25-0)
三、應用範圍
本方法適用於動物源性食品中四環素類藥物多殘留的HPLC檢測及確證。
五、實驗材料
FineTech® HLB固相萃取柱60mg/3mL(Cat.No.COHLB360);W品牌HLB固相萃取柱60mg/3mL。
六、實驗方法
1.樣品提取
稱取混勻牛奶試樣5 g(精確到0.01 g),置於50 mL離心管中,用0.1 mol/L EDTA-Mcllvaine 緩衝液溶解並定容至50 mL,漩渦混合1 min,冰水浴超聲10 min,轉移至50 mL離心管中,冷卻至0 ℃-4 ℃,5000 r/min離心10 min(溫度低於15 ℃),用快速濾紙過濾待淨化。
2、SPE柱淨化
(1)活化:HLB柱依次用5 mL甲醇和5 mL水活化。
(2)上樣和洗脫:準確吸取10 mL備用液過HLB固相萃取柱,待樣液全部流出後,依次用5 mL水和5 mL甲醇水(1:9,v/v)淋洗,棄去全部流出液。 2.0kPa以下減壓抽乾5 min,最後用10 mL甲醇-乙酸乙酯(5:95, v/v)洗脫, 收集洗脫液。
(3)重新溶解:洗脫液於40 ℃氮氣吹乾,加10 mmol/L三氟乙酸水溶液1.0 mL溶解殘餘物,濾膜過濾,供高效液相 色譜測定。
3、HPLC條件
設備:Waters Alliance 2690
檢測器:Waters 2487 雙波長檢測器;檢測波長:268nm
色譜柱:Welch Ultimate XB-C18 (4.6X250mm)
流動相:A:乙腈B:10 mmol/L三氟甲酸水溶液洗脫方式:梯度洗脫
表1 洗脫梯度條件
時間(min) | %A | %B |
0 | 4 | 96 |
8 | 30 | 70 |
18 | 35 | 65 |
20 | 4 | 96 |
28 | 4 | 96 |
流速:1 mL/min
柱溫:室溫
進樣體積:20 µL
七、實驗結果
1、0.8mg/kg牛奶基質中四環素的添加回收結果
表2 0.8mg/kg牛奶基質中四環素的添加回收結果
名稱 | 回收率(%) | 平均 回收率(%) | RSD(%) | ||
1 | 2 | 3 | |||
土黴素 | 81.25 | 80.13 | 80.15 | 80.51 | 1.37 |
四環素 | 79.48 | 80.95 | 80.5 | 80.31 | 1.83 |
金黴素 | 95.78 | 98.1 | 95.13 | 96.34 | 1.62 |
強力黴素 | 84.28 | 89.48 | 84.38 | 86.05 | 3.46 |
表3 W品牌0.8mg/kg牛奶基質中四環素的添加回收結果
名稱 | 回收率(%) | 平均 回收率(%) | |
1 | 2 | ||
土黴素 | 82.53 | 83.58 | 83.06 |
四環素 | 84.48 | 85.38 | 84.93 |
金黴素 | 95.45 | 96 | 95.73 |
強力黴素 | 84.85 | 87.3 | 86.08 |
2、 添加水平為0.8mg/kg牛奶基質中四環素檢測色譜圖
圖1 添加水平為0.8mg/kg牛奶基質中四環素檢測色譜圖