辣椒油中蘇丹紅染料的檢測方法

（FineTech®  蘇丹紅檢測柱）

一、實驗目的

本研究利用固相萃取法作為樣品的前處理方法，HPLC法作為檢測手段。該方法可簡化樣品的前處理過程，節 省有機溶劑的使用，操作簡便。

二、實驗目標物
蘇丹紅I(CAS:842-07-9)，蘇丹紅II(CAS:3118-97-6)，蘇丹紅III(CAS:85-86-9)，蘇丹紅IV(CAS:85-836)

三、應用範圍

本方法適用於食品中蘇丹紅染料的檢測的HPLC檢測及確證。

四、參考標準

《GB/T 19681-2005 食品安全國家標準 食品中蘇丹紅染料的檢測方法 高效液相色譜法》。

五、實驗材料

FineTech® 蘇丹紅檢測柱1g/6ml(Cat.No.COSD61000)。

六、實驗方法

1.樣品提取

稱取0.5 g(準確至0.001 g)辣椒油樣品，加正己烷5 mL渦動混合10 s，待檢測。

2、SPE柱淨化

(1)活化：用10 mL正己烷活化，柱中保持正己烷液面2 mm。

(2)上樣和洗脫：取待測液，通過保持柱中正己烷液面2 mm左右時上樣，控制流速，全過程不使柱乾涸，棄去 濾液。取30 mL正己烷淋洗柱，棄去淋洗液。取40 mL 20%丙酮正己烷溶液洗脫，收集洗脫液。

(3)重新溶解：洗脫液於40 ℃氮氣吹乾，加1.0 mL 40%甲基叔丁基醚甲醇(v/v)溶液定容，濾膜過濾，供高效液 相色譜測定。

3、HPLC條件

設備：Waters alliance 2690

檢測器：Waters 2487 雙波長檢測器；檢測波長：478nm、520nm

色譜柱：Welch Ultimate XB-C18 (4.6X250mm)

流動相：A:乙腈B:0.1mol/L甲酸水溶液

洗脫方式：梯度洗脫

表1 梯度洗脫條件

流速：1 mL/min
柱溫：30 ℃
進樣體積:20 μL

七、實驗結果

1、4mg/kg辣椒油基質中蘇丹紅的添加回收結果

表2 4mg/kg辣椒油基质中苏丹红的添加回收结果

2、添加水平為4mg/kg辣椒油中蘇丹紅檢測色譜圖

圖1 添加水平為4mg/kg辣椒油中蘇丹紅檢測色譜圖