牛奶中苯甲酸檢測的固相萃取方法
產品介紹
牛奶中苯甲酸檢測的固相萃取方法
規格介紹:牛奶中苯甲酸檢測的固相萃取方法
牛奶中苯甲酸檢測的固相萃取方法
(FineTech® MAX)
一、實驗目的
本研究利用固相萃取法作為樣品的前處理方法,HPLC法作為分析方法,檢測食品中苯甲酸含量。該方法可簡 化樣品的前處理過程,節省有機溶劑的使用,操作簡便
二、實驗目標物
苯甲酸 (CAS:65-85-0)
三、應用範圍
本方法適用於食品中苯甲酸的檢測的HPLC檢測及確證。
四、實驗材料
FineTech® MAX 固相萃取柱60mg/3mL(Cat. No. COMAX360)。
五、實驗步驟
1.樣品提取
準確稱取牛奶10 g於50 mL離心管中,加入0.25 mol/L的亞鐵氰化鉀溶液2 mL,搖勻,再加入1 mol/L的乙酸鋅溶液2 mL,搖勻,4000 r/ min離心10 min。上清液待淨化。
2、SPE柱淨化
(1) 活化:MAX 固相萃取柱使用前用3 mL甲醇、3 mL水活化。
(2) 上樣和洗脫:在MAX固相萃取柱上加入5 mL備用樣液,棄去流出液。用3 mL 2%氨水水溶液(v/v)、3 mL甲醇淋洗,棄去淋洗液;抽乾小柱;用2 mL 5%甲酸甲醇溶液(v/v)洗脫,收集洗脫液(整個上樣、洗脫過程保持流速1 mL/min)。 (3) 重新溶解:洗脫液過0.45 μm濾膜,上機測試。
3、HPLC條件
設 備:Waters Alliance 2690
色譜柱 :Welch Ultimate XB-C18 (4.6×250 mm, 5μm)
檢測器 :Waters 2487 紫外檢測器
流動相 :A:乙腈 B:磷酸鹽緩衝溶液(稱取磷酸二氫鉀 2.5g+磷酸氫二鉀 2.5g,加水溶解定容到1000mL)
洗脫方式:等度洗脫A:B=10:90
流速:1.0 mL/min
檢測波長:230 nm 進樣體積: 20 μL
六、實驗結果
1、25 mg/kg牛奶中苯甲酸的添加回收結果
表1 牛奶中苯甲酸25 mg/kg添加回收结果
目標物 | 回收率(%) | 平均 回收率(%) | RSD(%) | ||
1 | 2 | 3 | |||
苯甲酸 | 97.58 | 97.88 | 100.44 | 98.63 | 1.59 |
2、 添加水平為25 mg/kg牛奶中苯甲酸檢測的液相色譜圖
圖1 添加水平為25 mg/kg牛奶中苯甲酸檢測的液相色譜圖