動物源性食品中β-受體激動劑檢測的固相萃取方法

（FineTech® MCX）

一、實驗目的

本研究利用固相萃取法作為豬肉樣品的前處理方法，LC-MS/MS法作為檢測手段。該方法可簡化豬肉樣品的前
處理過程，節省有機溶劑的使用，操作簡便。

二、實驗目標物

五種β-受體激動劑物質：克崙特羅(CAS:37148-27-9)，沙丁胺醇(CAS:18559-94-9)，萊克多巴胺
(CAS:97825-25-7)，特布他林(CAS:23031-25-6)，妥布特羅(CAS:41570-61-0)。

三、應用範圍

本方法適用於動物源性食品中β-受體激動劑LC-MS/MS檢測及確證。

四、實驗材料

FineTech® MCX固相萃取柱200mg/6mL(Cat.No.COMCX6200)。

五、實驗方法

1、樣品提取

稱取均質豬肉試樣10.0ｇ試樣(精確至0.01 g)，加入15 mL pH 5.2的乙酸-乙酸銨緩衝溶液，1000 r/min 勻漿1
min，再加入β-葡萄醣醛酸苷肽酶/芳香磺酸酯酶溶液100 μL，於37 ℃±1 ℃振盪酶解過夜。取出冷卻後，10 ℃
9500 r/min離心10 min。取全部上清液。待淨化。

2、SPE柱淨化

(1) 活化：加入6 mL甲醇、6 mL水、6 mL 0.1 mmol/L高氯酸(pH 4.0)溶液活化。
(2) 上樣和洗脫：當溶劑液面到達柱吸附層表面時，立即倒入上述待淨化溶液，過柱，棄去濾液，用2 mL甲
醇、2 mL 2%甲醇水溶液淋洗，最後用7 mL5%氨化甲醇洗脫。
(3) 重新溶解：洗脫液緩慢氮氣流條件下吹至近幹，用甲醇-0.1%甲酸水溶液溶解定容至1.0 mL，渦旋混勻
1 min，用於LC-MS/MS測定。

3、LC-MS/MS條件

色譜柱：Venusil ASB C18（2.1×150mm，5 μm）；
質譜儀：API 4000
流動相：A:0.1%甲酸水溶液 B:甲醇溶液；
洗脫方式：梯度洗脫

表1 流動相梯度洗脫程序

流速：0.2 mL/min
柱溫：40 ℃
進樣體積：2 μL
質譜儀：API 4000
離子源：電噴霧(ESI)
掃描模式：正離子
檢測方式：多反應監測(MRM)

表2 質譜儀離子源參數

表3 ß-受體激動劑的母離子和子離子參數表

六、實驗結果

1、0.5μg/kg豬肉基質加標回收結果：

表4 0.5μg/kg豬肉基質加標回收結果

2、添加水平為0.5μg/kg豬肉基質中β-受體激動劑檢測色譜圖