動物源性食品中克倫特羅等3種β-受體激動劑殘留檢測的固相萃取
產品介紹
動物源性食品中克倫特羅等3種β-受體激動劑殘留檢測的固相萃取
規格介紹:動物源性食品中克倫特羅等3種β-受體激動劑殘留檢測的固相萃取
動物源性食品中克倫特羅等3種β-受體激動劑殘留檢測的固相萃取
(FineTech®MCX)
一、實驗目的
本研究利用固相萃取法作為動物源性食品(動物肌肉和肝臟)中克倫特羅(clenbuterol)、沙丁胺醇(salbutamol)、
萊克多巴胺(ractompamine)等3種β-受體激動劑的樣本前處理淨化方法,HPLC法作為檢測手段。 Copure™
MCX(60mg/3mL)柱淨化效果良好,回收率滿足測試要求,重現性好,與知名廠商同型號柱性能相當。
二、實驗目標物
克倫特羅(CAS:37148-27-9)、沙丁胺醇(CAS:18559-94-9)、萊克多巴胺(CAS:97825-25-7)。
三、應用範圍
本方法適用於動物源性食品(動物肌肉和肝臟)中克倫特羅(Clen)、沙丁胺醇(Sal)、萊克多巴胺(Rac)等3種β-受
體激動劑殘留藥物的檢測。
四、實驗材料
FineTech® MCX固相萃取柱60mg/3mL(Cat.No.COMCX360);W品牌MCX固相萃取柱60mg/3mL。
五、實驗方法
1.樣品提取
本稱取2±0.01 g經搗碎的豬肉樣品,於50 mL離心管中,加8 mL乙酸鈉緩衝液(0.2 mol/L,pH5.2),振盪提取15
min, 4000 r/min離心10 min,取上清液4 mL於50 mL離心管中,並加入0.1 mol/L高氯酸溶液5 mL,混合均勻,
用高氯酸調節pH到1±0.3。4000 r/min離心10 min後將全部上清液轉移到50 mL離心管中,用10 mol/L氫氧化鈉
溶液調節pH到11。加入10 mL飽和氯化鈉和10 mL異丙醇-乙酸乙酯(6:4, v/v)混合溶液,充分提取5 min,在4000
r/ min離心10 min。
轉移全部有機相,在40 ℃水浴下氮吹乾。加入5 mL乙酸鈉緩衝液(0.2 mol/L,pH5.2),超聲混勻,使殘渣充分溶
解後備用。
2、SPE柱淨化
(1) 活化:MCX柱依次用3 mL甲醇和3 mL水活化。
(2) 上樣和洗脫:取上述殘渣溶液上柱,控制流速0.5 mL/min。後依次用2 mL水、2 mL 2%甲酸水、2 mL甲
醇淋洗柱子並抽乾,最後用2 mL5%氨化甲醇溶液洗脫柱子上的待測成分。
(3) 重新溶解:收集洗脫液,於40 ℃氮氣吹乾,準確加入1.0 mL 0.1%甲酸/水-甲醇(95:5,v/v)溶液溶解殘餘
物,0.22 μm濾膜過濾,供高效液相色譜測定。
3、HPLC條件
設備:Waters Alliance 2690
色譜柱:Welch Ultimate XB-C18 (250×4.6mm Id,5 μm)
檢測器:紫外249nm,熒光激發波長226nm,發射波長306nm
流動相:A:甲醇 B:0.1%甲酸水溶液
洗脫方式:梯度洗脫
時間(min) | %A | %B |
0 | 10 | 90 |
8 | 48 | 52 |
15 | 48 | 52 |
15.1 | 10 | 90 |
22 | 10 | 90 |
流速:1.0 mL/min
柱溫:30 ℃
進樣量:20 µL
六、實驗結果
1、添加水平為1.0mg/kg豬肉基質中克倫特羅(Clen)、沙丁胺醇(Sal)、萊克多巴胺(Rac)等3種
β-受體激動劑的添加回收結果
表2 添加水平為1.0mg/kg豬肉基質中3種β-受體激動劑的添加回收結果
名稱 | 回收率(%) | 平均 回收率(%) | RSD(%) | ||
1 | 2 | 3 | |||
克倫特羅(Clen) | 85 | 88.4 | 89.4 | 87.6 | 2.6 |
沙丁胺醇(Sal) | 84.4 | 85.4 | 88.2 | 86 | 2.3 |
萊克多巴胺(Rac) | 85 | 86.6 | 88.4 | 86.7 | 2 |
表3 W品牌同型號柱,添加水平為1.0mg/kg豬肉基質中3種β-受體激動劑的添加回收結果
名稱 | 回收率(%) | 平均 回收率(%) | |
1 | 2 | ||
克倫特羅(Clen) | 79.9 | 78.4 | 79.2 |
沙丁胺醇(Sal) | 86.4 | 84.6 | 85.5 |
萊克多巴胺(Rac) | 86.9 | 81.8 | 84.4 |
2、添加水平為1.0mg/kg豬肉基質中三種β-受體激動劑檢測色譜圖
圖1 沙丁胺醇和萊克多巴胺的熒光色譜圖
圖2 克倫特羅的紫外色譜圖