動物源食品中氯黴素殘留檢測的固相萃取方法

（FineTech® HLB）

一、實驗目的

本法為以Copure™ HLB(60mg/3mL)柱開發的針對動物源食品(禽肉、畜肉和水產品)中氯黴素樣本前處理淨化
方法，HPLC法作為檢測手段。 Copure™ HLB(60mg/3mL)柱淨化效果良好，回收率滿足測試要求，重現性
好，與知名廠商同型號柱性能相當。

二、實驗目標物

氯黴素(CAS:56-75-7)

三、應用範圍

本方法適用於動物源性食品(禽肉、畜肉和水產品)中殘留藥物的檢測。

四、實驗材料

FineTech® HLB固相萃取柱60mg/3mL(Cat.No.COHLB360)；W品牌HLB固相萃取柱60mg/3mL。

五、實驗方法

1、樣品提取

取5±0.05 g豬肉樣品，於50 mL離心管中，加入20 mL乙酸乙酯混合2 min，4000 r/min離心15 min，取上清液
於另一離心管中，再用20 mL乙酸乙酯重複提取殘渣1次，合併兩次提取液，並加入500 μL氨水，於45 ℃旋轉蒸
發近幹，加入500 μL甲醇混合1 min，加入10 mL4%NaCl渦旋混勻10 s，加入10 mL正己烷搖勻20次，4000
r/min離心5 min，棄去上層，再用10 mL正己烷脫脂一次，最後加入500 μL氨水混勻供上柱淨化用。。

2、SPE柱淨化

(1)活化：依次用2 mL甲醇、2 mL水活化。
(2)上樣和洗脫：取上述備用液重力作用下過柱依次用2 mL水、1 mL甲醇/乙腈/水/氨水(15:15:65:5, v/v)淋洗上樣
柱並抽乾，最後用2 mL 5%氨化甲醇溶液洗脫柱子上的待測成分。
(3)重新溶解：收集洗脫液，於45 ℃氮氣吹乾，準確加入1.0 mL 甲醇/水(4:6, v/v)溶液溶解殘餘物混勻，0.22 μm
濾膜過濾，供高效液相色譜測定。

3、HPLC條件

設備：Waters Alliance 2690
檢測器：Waters 2487 雙波長檢測器；檢測波長：278nm
色譜柱：Welch Ultimate XB-C18 (250×4.6 mm，5 μm)
流動相：A: 水 B: 甲醇
洗脫方式：等度洗脫，甲醇:水=40:60(v/v)
流速：1.0 mL/min
柱溫：30 ℃
進樣量：20 μL

六、實驗結果

1、添加水平為0.5mg/kg豬肉基質中氯黴素(CAP)的添加回收結果

表1 添加水平為0.5mg/kg豬肉基質中氯黴素(CAP)的添加回收結果

表2 W品牌同型號柱，添加水平為0.5mg/kg豬肉基質中氯黴素(CAP)的添加回收結果

2、添加水平為0.5mg/kg豬肉基質中氯黴素(CAP)檢測色譜圖

圖1 添加水平為0.5mg/kg豬肉基質中氯黴素(CAP)檢測色譜圖