鹹鴨蛋中蘇丹紅染料的檢測方法
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鹹鴨蛋中蘇丹紅染料的檢測方法
規格介紹:鹹鴨蛋中蘇丹紅染料的檢測方法
鹹鴨蛋中蘇丹紅染料的檢測方法
(FineTech® 蘇丹紅檢測柱)
一、實驗目的
本研究利用固相萃取法作為樣品的前處理方法,HPLC法作為分析方法,檢測鹹鴨蛋中蘇丹紅的含量。該方法 可簡化樣品的前處理過程,節省有機溶劑的使用,操作簡便。
二、實驗目標物
蘇丹紅Ⅰ (CAS:842-07-9),蘇丹紅Ⅱ (CAS:3118-97-6),蘇丹紅Ⅲ (CAS:85-86-9),蘇丹紅Ⅳ (CAS:8583-6) 。
三、應用範圍
本方法適用於鮮鹹鴨蛋中蘇丹紅的檢測的HPLC檢測及確證。
四、實驗材料
FineTech® 蘇丹紅檢測柱500mg/6mL(Cat.No.COSD6500)
五、實驗步驟
1.樣品提取
準確稱取鹹鴨蛋黃1.0 g加入6 mL 正己烷,渦旋1 min,振盪5 min, 超聲處理5 min,4000 r/min離心5 min, 取正己烷層液備用。
2、SPE柱淨化
(1) 活化:蘇丹紅檢測柱使用前用10 mL正己烷活化。
(2) 上樣和洗脫:在蘇丹紅檢測柱上加入待淨化液,棄去流出液,然後用5 mL正己烷淋洗,棄去淋洗液,抽乾 小柱。用15 mL 20%丙酮正己烷洗脫,收集洗脫液。 (整個上樣洗脫過程保持流速1 mL/min)。
(3) 重新溶解:洗脫液40 ℃氮吹至近幹,加1 mL 40%甲基叔丁基醚甲醇溶液定容,過0.45 μm濾膜,待上機 測試。
3、HPLC條件
設 備:Waters Alliance 2690
色譜柱 :Welch Ultimate XB-C18 (4.6×250 mm,5 μm)
檢測器 :Waters 2487 紫外檢測器
流動相:A:乙腈 B:0.2%甲酸水溶液
洗脫方式:梯度洗脫
表1 梯度洗脫條件
時間(min) | %A | %B |
0 | 85 | 15 |
5 | 85 | 15 |
7 | 95 | 5 |
21 | 95 | 5 |
22 | 85 | 15 |
27 | 85 | 15 |
流速:1.0 mL/min
檢測波長:478nm 、520 nm
進樣體積: 20 μL
六、實驗結果
1、1 mg/kg鹹鴨蛋中蘇丹紅的添加回收結果
表2 1 mg/kg鹹鴨蛋中蘇丹紅的添加回收結果
名稱 | 回收率(%) | 平均回收率(%) | RSD(%) | ||
1 | 2 | 3 | |||
蘇丹紅Ⅰ | 106.3 | 102.9 | 109.8 | 106.3 | 3.24 |
蘇丹紅Ⅱ | 105.1 | 97.6 | 97.9 | 100.2 | 4.24 |
蘇丹紅Ⅲ | 1.5 | 102.4 | 107.7 | 103.8 | 3.23 |
蘇丹紅Ⅳ | 99.8 | 99.7 | 100.6 | 100 | 0.49 |
2、 添加水平為1 mg/kg鹹鴨蛋中蘇丹紅檢測的液相色譜圖
圖1 添加水平為1 mg/kg鹹鴨蛋中蘇丹紅檢測的液相色譜圖