血清中皮質甾類藥物檢測的快速萃取方法

                                                      SLE液液萃取柱

簡介
本應用為將 FineTech® SLE 1 mL(Cat.No.COSLE1CC)的液液萃取柱，應用於人血清中皮質甾類
藥(氫化可的鬆和曲安西龍)的快速提取和定量。
FineTech® SLE液液萃取柱提供了一個有效替代傳統的液液萃取(LLE)，可用於生物分析樣品製備
的方法。該柱可以提高分析物的回收率，使萃取過程沒有乳狀液的形成，並顯著降低了前處理過程中的萃取時
間。

圖1 使用FineTech® SLE液液萃取柱進行液液萃取的流程

方法
試劑
分析物和甲酸從安耐吉化學(中國)購買。所有試劑(HPLC級)均從阿拉丁(中國)購買。
樣品準備工作
樣品預處理：     將血清樣品純水稀釋並混勻，使樣品最終的pH接近8.0。取一部分空白稀釋血清備用；剩下的
                             空白稀釋血清加入一定體積的氫化可的松和曲安西龍儲備液，配製成濃度為1.5 mg/L的氫化可
                             的鬆和曲安西龍加標血清。
上樣：                 向SLE柱中加入1 mL預處理的樣品，加負壓啟動流速(5-15秒)，然後讓樣品吸附於填料中約
                             5分鐘
洗脫：                 向柱中加入4 mL乙酸乙酯，使溶劑通過重力流出並收集洗脫液，然後再向柱中加入4 mL的乙
                             酸乙酯。在收集結束後加適當的正力或負壓(-15" Hg)2分鐘並收集最終洗脫出的溶劑。

濃縮：                 將上述收集的洗脫液於35 ℃左右的溫度低真空下濃縮，再用緩氮氣流祛除乙醚溶液，使其濃
                             縮至近幹。取1 mL(60:40, v/v)的水/甲醇定容，供液HPLC分析。

HPLC條件

設備： Waters Alliance 2690
檢測器： Waters 2487 雙波長檢測器；檢測波長：245 nm
色譜柱： Welch Ultimate XB-C18 (4.6X250mm)
流動相： A:乙腈 B:0.1%甲酸水溶液

梯度洗脫條件：

流速： 1 mL/min
進樣體積： 20 µL
柱溫： 室溫
流速： 1 mL/min

分析物

分析物	結構
曲安西龍
氫化可的鬆

實驗結果

結果如下所示。回收率見表1和圖2表

表1.氫化可的松和曲安西龍的回收率

圖2.曲安西龍和氫化可的鬆的回收率

結論

FineTech® SLE液液萃取萃取柱可用於從人體血清中定量回收提取 氫化可的鬆和曲安西龍。