飲料中合成著色劑檢測的固相萃取方法
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飲料中合成著色劑檢測的固相萃取方法
飲料中合成著色劑檢測的固相萃取方法
詳細介紹:
飲料中合成著色劑檢測的固相萃取方法
（FineTech®聚酰胺小柱）
一、實驗目的
本研究利用固相萃取法作為樣品的前處理方法，HPLC法作為分析方法，檢測飲料中合成著色劑的含量。該方 法可簡化樣品的前處理過程，節省有機溶劑的使用，操作簡便。
二、實驗目標物
檸檬黃(CAS:1934-21-0)，日落黃(CAS:2783-94-0)，胭脂紅(CAS:569-64-2)，亮藍(CAS:3844-459)。
三、應用範圍
本方法適用於飲料中多種合成著色劑的檢測的HPLC檢測及確證。
四、實驗材料
FineTech® 聚酰胺小柱500mg/3mL(Cat. No. COPACR36)。
六、實驗步驟
1.樣品提取
準確稱取混有果肉的飲料5.0 g於15 mL離心管中，超聲波振盪提取5 min， 渦旋1 min，4000 r/min離心5 min，上清液轉移至15 mL離心管中，用水定容至5 mL。
2、SPE柱淨化
(1) 活化：聚酰胺小柱使用前用2 mL甲醇、2 mL水活化 。
(2) 上樣和洗脫：在聚酰胺小柱上加入5 mL待淨化樣品，然後用2 mL水、2 mL甲醇-甲酸（7:3,v/v）淋洗。然 後用5 mL 5%氨化甲醇進行洗脫，控制流速1 mL/min，收集洗脫液。
(3) 重新溶解：洗脫液於40℃氮吹至乾，加1 mL水定容，混勻，過0.45 μm濾膜，待上機測試。
3、HPLC條件
設 備：Waters Alliance 2690
色譜柱 ：Welch Ultimate XB-C18 (4.6×250 mm，5 μm)
檢測器 ：Waters 2487 紫外檢測器
流動相：A：甲醇 B：0.02mol/L乙酸銨緩衝溶液
洗脫方式：梯度洗脫
表1 梯度洗脫條件
| 時間(min) | %A | %B |
| -- | 5 | 95 |
| 10 | 20 | 80 |
| 18 | 60 | 40 |
| 25 | 60 | 40 |
| 25.1 | 5 | 95 |
| 40 | 5 | 95 |
六、實驗結果
1、5 mg/kg飲料中4種合成著色劑的添加回收結果
表2 5 mg/kg飲料中4中合成著色劑的添加回收結果
| 名稱 | 回收率(%) | 平均回收率(%) | RSD(%) | ||
| 1 | 2 | 3 | |||
| 檸檬黃 | 92.1 | 90.5 | 90.3 | 90.9 | 0.98 |
| 胭脂紅 | 86.4 | 82.1 | 84.7 | 84.4 | 1.76 |
| 日落黃 | 88.1 | 83.4 | 86.5 | 86 | 2.33 |
| 亮藍 | 90.6 | 82.3 | 89.6 | 87.5 | 4.89 |
2、 添加水平為5 mg/kg飲料中4種合成著色劑檢測的液相色譜圖
圖1 添加水平為5 mg/kg飲料中4種合成著色劑檢測的液相色譜圖
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化妝品中氫化可的鬆檢測的固相萃取方法 （FineTech® HLB） 一、實驗目的 本研究利用固相萃取作為樣品前處理方法，HPLC作為分析方法，檢測化妝品樣品中的氫化可的鬆的殘留水 平。該方法操作簡便，可簡化樣品前處理過程，減少有機溶劑的使用。 二、實驗目標物氫化可的鬆(CAS:50-23-7) 三、應用範圍 本方法適用於化妝品中氫化可的鬆的檢測的HPLC檢測及確證。 四、實驗材料 FineTech® HLB固相萃取柱60 mg/3 mL(Cat.No.COHLB360)。 五、實驗方法 1.樣品提取 準確稱取沐浴露0.2 g(精確到0.01 g)於10 mL具塞塑料離心管中，加入3 mL飽和的氯化鈉溶液，渦旋振盪1 min使樣品分散，準確加入2 mL乙腈，充分渦旋提取2 min，5000 r/min離心10 min，吸出上層清液於另一50 mL具塞塑料離心管中，下層氯化鈉溶液用2 mL乙腈重複提取步驟一次，合併二次乙腈提取液，往提取液中準確加入40 mL 高純水，混勻，加入10% 亞鐵氰化鉀水溶液0.2 mL，混勻，加入20% 乙酸鋅水溶液0.2 mL混勻，5000 r/min離心10 min，上清液待淨化。 2、SPE柱淨化 (1)活化：HLB固相萃取柱使用前依次使用5 mL甲醇和10 mL水活化。(2)上樣和洗脫：將待淨化液的樣品溶液加入已活化好的固相萃取柱中，以1 mL/min的流速過柱，棄去濾液。用 2x5 mL乙腈-水溶液(10:90, v/v)淋洗固相萃取柱，棄去淋洗液，用吸耳球吹出小柱中殘留液。用4 mL甲醇洗脫 固相萃取柱，收集洗脫液。(3)重新溶解：洗脫液於40 ℃氮吹吹乾，用2 mL甲醇-水溶液(5:5, v/v)定容，0.22 µm微孔濾膜過濾，供HPLC 上機測試。 3、HPLC條件 設備：Waters Alliance 2690 色譜柱：Welch Ultimate XB-C18 (4.6X250mm) 檢測器：Waters 2487 紫外檢測器 檢測波長：380 nm 流動相：A：甲醇 B：0.1mol/L甲酸水溶液 洗脫方式：梯度洗脫 表1 梯度洗脫條件 時間(min) %A %B 0 20 80 15 40 60 15.1 90 10 19 90 10 19.1 20 80 21.1 20 80 流速：1 mL/min 進樣體積：20 μL 六、實驗結果 1、化妝品中氫化可的鬆的10mg/kg添加回收結果 表2 化妝品中氫化可的鬆的10mg/kg添加回收結果 目標物 回收率(%) 平均 回收率(%) RSD(%) 1 2 3 氫化可的鬆 98.8 97.9 98.5 98.4 0.46 2、 添加水平為10mg/kg化妝品中氫化可的松檢測色譜圖 圖1 添加水平為10mg/kg化妝品中氫化可的松檢測色譜圖
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紡織品中禁用偶氮染料檢測的固相萃取方法 （FineTech® 偶氮染料檢測柱） 一、實驗目的 本實驗利用固相支持液液萃取法作為樣品的前處理方法，GC-MS法作為檢測手段。該方法可簡化樣品的前處理過程，節省有機溶劑的用量。 二、實驗目標物 3,3'-二甲基聯苯胺(CAS:119-93-7)，鄰甲苯胺(CAS:95-53-4)，對氯苯胺(CAS:106-47-8)，2,4-二氨基甲苯(CAS:95-80-7)，2,4-二氨基苯甲醚(CAS:615-05-4) 三、應用範圍 本方法適用於紡織品中禁用偶氮染料的檢測及確證。 四、實驗材料 FineTech® Copure™ 偶氮染料檢測柱(Cat. No. COAZO060)。 五、實驗方法 1、樣品提取 取代表性試樣，剪成約5 mmX5 mm的小片，混合。從混合樣中稱取1.0 g(精確至0.01 g)於50 mL具塞玻璃管中，加入17 mL預熱到(70±2) ℃的檸檬酸緩衝溶液，將反應器密閉，用力振搖，使所有試樣浸於液體中，置於已恆溫至(70±2) ℃的水浴中保溫30 min，使所有的試樣充分潤濕。然後，打開反應器，加入3.0 mL連二亞硫酸鈉溶液，並立即密閉振搖，將反應器再置於(70±2) ℃水浴中保溫30 min，取出後2 min內冷卻至室溫。 2、上樣和洗脫 將上述備用液過柱，任其吸附15 min，用4X20 mL乙醚分四次洗提反應器中的試樣，每次需混合乙醚和試樣，然後將乙醚洗液倒入提取柱中，收集乙醚提取液於圓底燒瓶中。 3、濃縮將上述收集的盛有乙醚提取液的圓底燒杯置於真空旋轉蒸發器上，於35 ℃左右的溫度低真空下濃縮至近1 mL，再用緩氮氣流去除乙醚溶液，使其濃縮至近幹。取1.0 mL甲苯定容，供氣相色譜-質譜分析。 4、GC-MS條件 色譜柱：HP-5MS（30 mx0.32 mm，0.25 μm）或者相當進樣口：220 ℃柱溫：40 ℃(保持0.5 min)，以20 ℃/min升溫至150 ℃(保持1.5 min)，以15 ℃/min升溫至210 ℃(保 持0.5min)，以10 ℃/min升溫至250 ℃(保持3 min)載氣：氦氣流速：0.9 mL/min進樣體積:1 μL 六、實驗結果 1、添加回收結果 實驗結果表明：偶氮染料檢測柱適用於紡織品中禁用偶氮物質檢測的預處理，能淨化紡織品樣品，實驗加標回收率能滿足定量實驗的要求。 表1. 部分10mg/kg禁用芳香胺的回收率 化合物 保留時間(min) 回收率(%) 3,3'-二甲基聯苯胺 17.11 89.04 鄰甲苯胺 5.492 80.85 對氯苯胺 6.508 83.77 2,4-二氨基甲苯 8.367 62.25 2,4-二氨基苯甲醚 9.307 53 備註：國標要求 2,4-二氨基甲苯回收率>50% 2,4-二氨基苯甲醚回收率>20% 鄰甲苯胺回收率>50% 其餘各芳香胺回收率>70% 2、添加水平為10mg/kg皮革中部分禁用芳香胺檢測色譜圖
