食品中喹諾酮檢測的固相萃取方法

（FineTech® HLB）

一、實驗目的

本研究利用固相萃取法作為樣品的前處理方法，HPLC法作為檢測手段。該方法可簡化樣品的前處理過程，節
省有機溶劑的使用，操作簡便。

二、實驗目標物

依諾沙星(CAS:74011-58-8)，恩諾沙星(CAS:93106-60-6)，培氟沙星(CAS:70458-95-6)，丹諾沙星
(CAS:119478-55-6)

三、應用範圍

本方法適用於食品中喹諾酮的HPLC檢測及確證

四、實驗材料

FineTech® HLB固相萃取柱200mg/6mL(Cat.No.COHLB6200)。

五、實驗方法

1、樣品提取

稱取均質牛奶試樣5.0 g試樣(精確至0.001 g)於50 mL離心管中，加入20 mL EDTA-Mellvaine緩衝溶液，
1000 r/ min渦旋混合1 min，超聲提取10 min，10000 r/min離心5 min(溫度低於5 ℃)，提取三次合併上清液。

2、SPE柱淨化

(1)活化：淨化前用6 mL甲醇、6 mL水活化。
(2)上樣和洗脫：將提取液以2 mL/min的速度過柱，棄去濾液，用2 mL5%甲醇水溶液淋洗，棄去淋洗液，將小
柱抽乾，再用 6 mL甲醇洗脫並收集洗脫液。
(3)重新溶解：50 ℃緩慢氮氣流條件下吹至近幹，用1 mL0.2%甲酸水溶液溶解。 1000 r/min渦旋混合1 min，
經0.45 μm有機濾膜過濾後用於上機測定。

3、HPLC條件

設備：Waters Alliance 2690
檢測器：Waters 2487 雙波長檢測器 檢測波長：254nm
色譜柱：Welch Ultimate XB-C18 (4.6X250mm，5 μm)
流動相：A: 乙腈 B: 0.1%甲酸的水溶液
洗脫方式：梯度洗脫

表1 流動相梯度洗脫程序

流速：1 mL/min
柱溫：室溫
進樣體積：20 μL

六、實驗結果

1、1mg/kg牛奶基質中喹諾酮的添加回收結果：

表2 1mg/kg牛奶基質中喹諾酮的添加回收結果

2、 添加水平為1mg/kg牛奶基質中喹諾酮檢測色譜圖

圖1 添加水平為1mg/kg牛奶基質中喹諾酮檢測色譜圖