奶製品中己烯雌酚檢測的固相萃取方法

（FineTech® MAX）

一、實驗目的

本研究利用固相萃取法作為樣品的前處理方法，HPLC法作為檢測手段。該方法可簡化樣品的前處理過程，節
省有機溶劑的使用，操作簡便。

二、實驗目標物

己烯雌酚(CAS:56-53-1)。

三、應用範圍

本方法適用於奶製品中己烯雌酚HPLC檢測及確證。

四、實驗材料

FineTech®  MAX固相萃取柱60mg/3mL(Cat.No.COMAX360)。

五、實驗方法

1、樣品提取

取5 mL牛奶樣品，置於離心管中，加入10 mL乙腈，渦旋混合3 min，3500 r/min離心10 min，取上清液於離
心管中，再向樣品中加入5 mL乙腈，同前操作，合併提取液，50 ℃下氮吹至體積小於0.1 mL，加水10 mL，
用5 mol/L NaOH 調節pH至11.0，4 ℃，9000 r/min離心5 min，備用。

2、SPE柱淨化

(1)活化：加入2 mL甲醇、2 mL水活化。
(2)上樣和洗脫：將樣品上清液上柱，流速為1 mL/min，依次用1 mL 氨水-水(1:19, v/v)，0.5 mL甲醇以3 mL
/min的流速淋洗，棄去淋洗液，用4 mL甲酸-甲醇(1:19, v/v)洗脫，流速為 1 mL/min，收集洗脫液。
(3)重新溶解：洗脫液在氮吹儀上於40 ℃水浴中吹乾，加入1 mL流動相，渦旋30 s溶解。過0.2 μm濾膜後，用
於HPLC測定。

3、HPLC條件

設備：Waters Alliance 2690
檢測器：Waters 2487 雙波長檢測器；檢測波長：245 nm
色譜柱：Welch Ultimate XB-C18 (4.6X250mm)
流動相：等度洗脫，0.1%甲酸水/甲醇=30/70
流速：1 mL/min
進樣體積：20 μL
柱溫：室溫

六、實驗結果

1、牛奶基質加標回收結果

表1 牛奶中0.2mg/kg加標回收實驗結果

2、 添加水平為0.2mg/kg牛奶基質中乙烯雌酚檢測色譜圖

图1 添加水平为0.2mg/kg牛奶基质中乙烯雌酚检测色谱图