牛奶中氫化可的鬆檢測的固相萃取方法
產品介紹
牛奶中氫化可的鬆檢測的固相萃取方法
規格介紹:牛奶中氫化可的鬆檢測的固相萃取方法
牛奶中氫化可的鬆檢測的固相萃取方法
(FineTech® Silica)
一、實驗目的
本研究利用固相萃取法作為樣品前處理方法,HPLC法作為檢測手段。該方法操作方便,可簡化樣品的前處理 過程,節省有機溶劑的使用。
二、實驗目標物
氫化可的鬆(CAS:50-23-7)
三、應用範圍
本方法適用於牛奶中氫化可的鬆的檢測及確證。
四、實驗材料
FineTech® Silica固相萃取柱500mg/6mL(Cat.No.COSIL6500)。
五、實驗方法
1.樣品提取
稱取牛奶試料5 g於50 mL離心管中,加30 mL乙酸乙酯,均質1 min,350 r/min搖床振動20 min,4200 r/min離心10 min,移取乙酸乙酯層。殘渣中加乙酸乙酯25 mL,均質1 min,350 r/min搖床振動20 min,4200 r/min離 心10 min,移取乙酸乙酯層。合併兩次提取液,40 ℃旋轉至近幹,加乙酸乙酯1 mL和正己烷5 mL,溶解殘渣, 待淨化。
2、SPE柱淨化
(1)活化:用6 mL正己烷活化Silica固相萃取柱。
(2)上樣和洗脫:取待測液,通過Silica固相萃取小柱富集,棄去流出液。用6 mL正己烷淋洗固相萃取柱,真空 抽乾5 min,棄去流出液。用6 mL正己烷-丙酮(6:4, v/v)洗脫萃取柱,收集洗液。
(3)重新溶解:洗脫液於40 ℃氮氣吹乾,加20%乙腈水溶液2.0 mL溶解殘餘物,過0.22 μm濾膜,供高效液相 色譜測定。
3、HPLC條件
設備:Waters Alliance 2690
檢測器:Waters 2487 雙波長檢測器檢測波長:254 nm
色譜柱:Welch Ultimate XB-C18 (4.6X250mm)
流動相:A:乙腈B:0.1%甲酸水溶液
洗脫方式:梯度洗脫
表1 梯度洗脫條件
時間(min) | %A | %B |
0 | 20 | 80 |
15 | 40 | 60 |
15.1 | 90 | 10 |
19 | 90 | 10 |
19.1 | 20 | 80 |
21.1 | 20 | 80 |
流速:1 mL/min
進樣體積:20 μL
六、實驗結果
1、 牛奶中氫化可的鬆的1mg/kg添加回收結果
表2 牛奶中氫化可的鬆的1mg/kg添加回收結果
目標物 | 回收率(%) | 平均 回收率(%) | RSD(%) | ||
1 | 2 | 3 | |||
氫化可的鬆 | 98.8 | 97.8 | 98.4 | 98.6 | 0.29 |
2、 添加水平為1mg/kg牛奶中氫化可的鬆檢測色譜圖
圖1 添加水平為1mg/kg牛奶中氫化可的鬆檢測色譜圖