水產品中喹乙醇檢測的固相萃取方法
產品介紹
水產品中喹乙醇檢測的固相萃取方法
規格介紹:水產品中喹乙醇檢測的固相萃取方法
水產品中喹乙醇檢測的固相萃取方法
(FineTech® MAX)
一、實驗目的
本研究利用固相萃取作為樣品前處理方法,HPLC作為分析方法,檢測水產品樣品中的喹乙醇的殘留水平。該 方法操作簡便,可簡化樣品前處理過程,減少有機溶劑的使用。
二、實驗目標物
喹乙醇(CAS: 23696-28-8)。
三、應用範圍
本方法適用於水產品中喹乙醇的檢測的HPLC檢測及確證。
四、實驗材料
FineTech® MAX 固相萃取柱60mg/3 mL(Cat. No. COMAX360)。
五、實驗步驟
1.樣品提取
準確稱取5 g勻漿魚肉樣品(精確到0.001 g)於50 mL離心管中,加入35 mL甲醇-水溶液(5:95, v/v),離心管置入搖床中,室溫下恆溫振盪器振盪速度110 r/min,避光振盪45 min。提取液在3500 r/min下離心10 min,上清 液經濾紙過濾,濾液加入10 mL正己烷,充分混勻後,以5000 r/min離心10 min,棄去上層溶液,下層溶液待 淨化。
2、SPE柱淨化
(1) 活化:MAX 固相萃取柱使用前依次使用3 mL甲醇和3 mL水活化。
(2) 上樣和洗脫:將待淨化的樣品清液加入已活化好的固相萃取柱中,以1 mL/min的流速過柱,棄去濾液。用3 mL甲醇-水溶液(5:95, v/v)淋洗固相萃取柱,棄去淋洗液,用吸耳球吹出小柱中殘留液。用5 mL甲酸-乙酸乙 酯溶液(1:9, v/v)洗脫固相萃取柱,收集洗脫液。
(3) 重新溶解:洗脫液於40 ℃氮吹吹乾,用2 mL甲醇定容,0.22 μm微孔濾膜過濾,供HPLC上機測試。
3、HPLC條件
設備:Waters Alliance 2690
色譜柱:Welch Ultimate XB-C18 (4.6×250 mm,5μm )
檢測器:Waters 2487 紫外檢測器
檢測波長:380 nm
流動相:A:甲醇 B:0.1%甲酸水溶液
洗脫方式:梯度洗脫
表1 洗脫梯度條件
時間(min) | %A | %B |
0 | 15 | 85 |
3 | 15 | 85 |
7 | 70 | 30 |
12 | 70 | 30 |
16 | 15 | 85 |
20 | 15 | 85 |
流速:1 mL/min
進樣體積:20μL
六、實驗結果
1、魚肉中喹乙醇2 mg/kg添加回收結果
表2 魚肉中喹乙醇2 mg/kg添加回收結果
目標物 | 回收率(%) | 平均 回收率(%) | RSD(%) | ||
1 | 2 | 3 | |||
喹乙醇 | 86.7 | 81.1 | 86.1 | 102.37 | 3.6 |
2、 添加水平為2 mg/kg魚肉中喹乙醇檢測色譜圖
圖1 添加水平為2 mg/kg魚肉中喹乙醇檢測色譜圖