動物源性食品中氯黴素檢測的固相萃取方法
產品介紹
動物源性食品中氯黴素檢測的固相萃取方法
規格介紹:動物源性食品中氯黴素檢測的固相萃取方法
動物源性食品中氯黴素檢測的固相萃取方法
(FineTech® C18)
一、實驗目的
本研究利用固相萃取法作為樣品的前處理方法,LC-MS/MS法作為檢測手段。該方法可簡化樣品的前處理過
程,節省有機溶劑的使用,操作簡便。
二、實驗目標物
氯黴素(CAS:56-75-7)。
三、應用範圍
本方法適用於動物源性食品中氯黴素的LC-MS/MS檢測及確證。
四、實驗材料
FineTech® C18固相萃取柱1000mg/6mL(Cat.No.COC1861000)。
五、實驗方法
1、樣品提取
將稱取5 g豬肉試樣,精確到0.01 g。置於50 mL離心管中,加入5 mL水,於渦旋混合器上快速混合1 min,使試
樣完全溶解。準確加入15 mL乙酸乙酯,在振盪器上振盪10 min,以3000 r/min離心10 min,準確吸取上層乙酸
乙酯12 mL轉入15 mL的離心管中,置於濃縮吹氮儀在45 ℃吹掃蒸乾,加入5 mL水溶解,待淨化。
2、SPE柱淨化
(1)活化:依次採用5 mL甲醇、5 mL水活化C18固相萃取柱。
(2)淨 化:將提取液過C18固相萃取柱,待溶液完全流出後,用2×3 mL水過柱,然後再用5 mL乙腈:水(2:8,
v/v)淋洗柱,棄去全部淋出液。用真空泵減壓抽乾10 min。
(3)洗脫:用6 mL乙酸乙酯洗脫,收集洗脫液於10 mL離心管中,於45 ℃用氮氣吹乾液吹乾,用乙腈:水(2:8,
v/v)定容至1 mL,供LC-MS/MS上機測定。
3、LC-MS/MS條件
色譜柱:Venusil ASB C18(2.1×150 mm,5 μm)
質譜儀:API 4000
流動相:A: 10 mmol/L乙酸銨溶液 B: 甲醇
流速:0.2 mL/min
柱溫:40 ℃
進樣體積:5 μL
離子源:電噴霧(ESI),負離子模式
檢測方式:多反應監測(MRM)
表1 質譜儀離子源參數
Source/Gas | |
Collision Gas(CAD) | 6 |
Curtain Gas(CUR) | 30 |
Ion Source Gas 1(GS 1) | 50 |
Ion Source Gas 2(GS 2) | 50 |
Ion Spray Voltage(IS) | -4500 |
Temperature(TEM) | 550 |
Interface Heater(ihe) | On |
表2 氯黴素及內標的母離子和子離子參數表
物質名稱 | 保留時間(min) | 檢測離子對 | DP | EP | CE | CXP |
氯黴素 | 4.9 | 320.9/151.9 | -60 | -10 | -25 | -12 |
320.9/256.9 | -60 | -10 | -25 | -12 | ||
氯黴素-D5 | 4.9 | 326.1/157.0 | -60 | -10 | -25 | -12 |
六、實驗結果
1、2μg/kg豬肉基質氯黴素添加回收結果
表3 2μg/kg豬肉基質氯黴素添加回收結果
名称 | 回收率(%) | 平均 回收率(%) | RSD(%) | ||
1 | 2 | 3 | |||
氯霉素 | 98.31 | 96.28 | 90.61 | 95.07 | 4.2 |
2、添加水平為2μg/kg豬肉基質中氯黴素檢測色譜圖
圖1 添加水平為0.5mg/kg韭菜基質中農殘檢測色譜圖