鹹鴨蛋中蘇丹紅染料的檢測方法

（FineTech®  蘇丹紅檢測柱）

一、實驗目的 

本研究利用固相萃取法作為樣品的前處理方法，HPLC法作為分析方法，檢測鹹鴨蛋中蘇丹紅的含量。該方法 可簡化樣品的前處理過程，節省有機溶劑的使用，操作簡便。

二、實驗目標物
蘇丹紅Ⅰ (CAS:842-07-9)，蘇丹紅Ⅱ (CAS:3118-97-6)，蘇丹紅Ⅲ (CAS:85-86-9)，蘇丹紅Ⅳ (CAS:8583-6) 。

三、應用範圍

本方法適用於鮮鹹鴨蛋中蘇丹紅的檢測的HPLC檢測及確證。

四、實驗材料

FineTech® 蘇丹紅檢測柱500mg/6mL(Cat.No.COSD6500)

五、實驗步驟

1.樣品提取

準確稱取鹹鴨蛋黃1.0 g加入6 mL 正己烷，渦旋1 min，振盪5 min， 超聲處理5 min，4000 r/min離心5 min， 取正己烷層液備用。

2、SPE柱淨化

(1) 活化：蘇丹紅檢測柱使用前用10 mL正己烷活化。
(2) 上樣和洗脫：在蘇丹紅檢測柱上加入待淨化液，棄去流出液，然後用5 mL正己烷淋洗，棄去淋洗液，抽乾 小柱。用15 mL 20%丙酮正己烷洗脫，收集洗脫液。 （整個上樣洗脫過程保持流速1 mL/min)。
(3) 重新溶解：洗脫液40 ℃氮吹至近幹，加1 mL 40%甲基叔丁基醚甲醇溶液定容，過0.45 μm濾膜，待上機 測試。

3、HPLC條件

設 備：Waters Alliance 2690
色譜柱 ：Welch Ultimate XB-C18 (4.6×250 mm，5 μm)
檢測器 ：Waters 2487 紫外檢測器
流動相：A：乙腈 B：0.2%甲酸水溶液
洗脫方式：梯度洗脫

表1 梯度洗脫條件

流速：1.0 mL/min
檢測波長：478nm 、520 nm
進樣體積: 20 μL

六、實驗結果

1、1 mg/kg鹹鴨蛋中蘇丹紅的添加回收結果

表2 1 mg/kg鹹鴨蛋中蘇丹紅的添加回收結果

2、 添加水平為1 mg/kg鹹鴨蛋中蘇丹紅檢測的液相色譜圖

圖1 添加水平為1 mg/kg鹹鴨蛋中蘇丹紅檢測的液相色譜圖