血清中布洛芬藥物檢測的快速萃取方法

簡介
本應用為將FineTech®  SLE 1 mL(Cat.No.COSLE1CC)的液液萃取柱，應用於人體血清中布洛芬
藥物的快速提取和定量。

FineTech® SLE液液萃取柱提供了一個有效替代傳統的液液萃取(LLE)，並可用於生物分析樣品製
備的方法。該柱可以提高分析物的回收率，使萃取過程沒有乳狀液的形成，並顯著降低前處理過程中的萃取時
間。

圖1 使用FineTech® SLE液液萃取柱進行液液萃取的流程

方法
試劑
分析物和甲酸從安耐吉(中國)購買。所有試劑(HPLC級)均從阿拉丁(中國)購買。

樣品準備工作
樣品預處理： 將血清樣品用1%的甲酸(1:1,v/v)稀釋並混勻，使樣品最終的pH在3.2左右。取一部分空白血清
                         備用；剩下的空白血清加入一定體積的布洛芬儲備液，配製成濃度為10 mg/L的布洛芬加標血清。
上樣：             向SLE柱中加入1 mL預處理的樣品，加負壓或正壓啟動流速(5-15秒)，然後讓樣品吸附於
                         填料中約5分鐘。
洗脫：             向柱中加入4 mL甲基叔丁基醚。使溶劑通過重力流出並收集洗脫液，然後再向柱中加入4 mL
                         的甲基叔丁基醚，收集洗脫液。在收集結束後加適當的正壓或負壓(-15" Hg)2分鐘並收集最
                         終洗脫出的溶劑。

濃縮：             將上述收集的提取液於35 ℃左右的溫度低真空下濃縮，再用緩氮
                         氣流去除乙醚溶液，使其濃縮至近幹。取1 mL(60:40,v/v)的水/
                         甲醇定容，過0.22 μm濾膜，供液HPLC分析。

HPLC條件

設備： Waters Alliance 2690
檢測器： Waters 2487 雙波長檢測器；檢測波長：220 nm
色譜柱： Welch Ultimate XB-C18 (4.6X250mm)
流動相： A:乙腈 B:0.1% 甲酸水溶液

洗脫方式：等度洗脫 A:B=50:50
流速： 1 mL/min
進樣體積： 20 μL
柱溫： 室溫

分析物

分析物	結構
布洛芬

實驗結果

結果如下所示。回收率見表1和圖2

表1.布洛芬的回收率

圖2.布洛芬的回收率

結論

FineTech®  SLE液液萃取柱可用於從人體血清中定量回收提取布洛芬。